支原体是最小和最/简单的自我复制生命体。由于支原体体积小(100 nm),缺乏刚性的细胞壁,因此肉眼无法检测到支原体,它们可以透过一般过滤膜,并对很多抗生素都具有抵抗力。支原体污染是细胞培养中的一个主要问题,不止影响实验结果的有效性,更会影响细胞工程制药的质量和安全性。
支原体的特征:
支原体属于柔膜菌纲,其成员特征为缺乏细胞壁以及拥有多变的形态。支原体对包括原代细胞在内的所有真核细胞类型具有高度传染性。成百上千的支原体可以附着在一个细胞上,与细胞膜融合、繁殖,最终数量可以超过培养细胞1000倍。支原体可以*改变细胞特性和扭曲研究结果。而支原体脂蛋白可被Toll样受体2(TLR2)识别并激活免疫细胞。支原体没有细胞壁的特点使它们对常用的抗生素(如青霉素和链霉素)产生抗性。此外,它们的尺寸微小(~100nm),能够穿透过0.2μm的标准过滤膜。因此,我们需要采取预防措施来防止细胞培养物受到污染。
支原体污染对细胞功能的主要影响:
支原体与宿主细胞竞争营养素和代谢物前体。因此,它们能改变许多细胞功能,影响到细胞代谢和细胞生长,最终导致细胞死亡。通过对受污染的人源细胞进行微阵列分析,科学家发现支原体严重影响数百个基因的表达,当中包括受体、离子通道、生长因子和致癌基因。一旦与宿主细胞膜粘附或融合,支原体可以通过干扰信号级联和细胞因子产生,进一步损害细胞。这些有害效应会强烈干扰实验数据,导致研究结果无效,特别是当涉及表达TLR2的免疫细胞时,如巨噬细胞。
检测支原体的 5 大原因:
1.珍贵细胞系的损失
2.对数据可靠性和再现性的严重影响
3.大多数学术期刊都要求进行测试
4.全球高达35%的污染率,包括细胞库
5.时间和金钱的损失
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