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Enzo — proteinA和宿主细胞残留以及蛋白聚集检测

发布时间:2022-07-15   点击次数:219次

proteinA残留检测


金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococal Protein A,SPA)是一种从金黄色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质。能特异性地与人或哺乳动物抗体(主要是IgG)的Fc区域结合。所以常常使用protein A的柱子来分离纯化单克隆抗体。但是在抗体纯化过程中,protein A能够从柱子中析出,容易导致抗体的污染,抗体中的protein A会引发人体的免疫反应,所以使用治疗的单抗需要严格检测其中protein A的含量。Enzo提供的protein A ELISA Kit能够快速有效检测单克隆抗体中protein A的含量。

Enzo — proteinA和宿主细胞残留以及蛋白聚集检测

Protein A标准曲线

A.alphaLISA protein A assay. A 12-point dilution series of the positive control was prepared ranging from 100.000-0.3pg/ml was prepared. 12 background points were used to calculate LDL.  


B.Protein A ELISA assay. A 9-point dilution series of the positive control was prepared ranging from 100,000-10pg/ml.

Enzo — proteinA和宿主细胞残留以及蛋白聚集检测Residual Protein A screen of a panel of human antibodies. A panel of 10 human antibodies was screened for detectible levels of protein A。
Enzo — proteinA和宿主细胞残留以及蛋白聚集检测煮沸后不同protein A结构的分析识别。从试剂盒标准曲线中插值得到浓度。通过 将观察到的浓度除以预期浓度计算出的回收率百分比。 A. Natural Protein A from S. aureus (Millipore), n=9; B. Recombinant Protein A from E. coli (Repligen), n=9; C. Recombinant Cys-Protein A from E. coli (GE), n=12; and D. Recombinant alkaline-resistant Protein A variant from E. coli (MabSelet SuRe from GE), n=12; graphical data represents statistical mean +/- 1 standard deviation。
产品名称产品货号规格
ADI-900-057Protein AELISAkit1*96 wells


Enzo的ProteinAELISAKit的特点

● 高灵敏度测量,检测纯化人源化单克隆抗体制剂中低至9.01pg/ml(< 1 ppm)的protein A残留。

● 确保准确的结果,因为它能识别不同几种结构的protein A。

● 高通量形式,可检测多达的37份样品(复孔),耗时不到3小时。

● 与其他技术相比,提供了经济高效的解决方案,降低每次测试成本。

● 十分适用于单克隆抗体制剂中protein A变体的污染分析和测量。


Hostcell protein 残留检测


宿主细胞蛋白(hostcellprotein, HCP)是指生物制品中来自生产细胞系的宿主细胞的蛋白成分,主要包括宿主细胞分泌的蛋白以及细胞凋亡、代谢产生的部分结构蛋白。作为生物制品生产过程中的残留杂质,HCP具有潜在的安全风险,包括诱导免疫应答。建立合适的HCP残留量检测方法将有助于监测生产工艺,确保生物制品的质量和安全。Enzo可以提供灵敏的ELISA定量测定中国仓鼠卵巢(CHO)表达系统中和大肠杆菌(E.coli)表达的蛋白中的宿主细胞蛋白质污染。

产品名称产品货号规格
ENZ-KIT128-0001CHO host cell protein ELISA kit1*96 wells
ENZ-KIT127-0001E. coli host cell protein ELISA kit1*96 wells


产品特点

● CHO宿主细胞蛋白质的灵敏测量,检测低至10 ng/ml;大肠杆菌宿主细胞蛋白质的灵敏测量,检测低至30ng/ml

● 检测差异小,稳定性好

● 高通量形式,3小时内可以产生结果

● 完全定量结果超过半定量蛋白质印迹分析的


蛋⽩聚集检测


Enzo可以为监测溶液中的肽和蛋白质聚集提供了简单的分析试剂盒。这对于确定蛋白质的最佳储存配方、筛选促进或抑制蛋白质聚集的化合物以及潜在的分子伴侣活性的灵敏测量是有重要作用的。该试剂盒可用于简化蛋白质加工和配方优化程序。相对于传统的蛋白质聚集检测染料,例如硫黄素T,Enzo检测试盒可以检测更宽范围的蛋白质聚集,产生更亮的信号,提供至少2个数量级的线性动态范围,并在宽范围的pH值(4~10)和缓冲剂组合物中提供优异的能。该分析的灵敏度在亚微摩尔范围内,在浓缩的蛋白质溶液中可检测到少至1-5%的蛋白质聚体。该分析能够以稳定和高通量的方式提供蛋白质聚集的定量分析(z’因子得分> 0.5)。冻干的天然和聚集蛋白作为阴性和阳性对照,用于监测蛋白聚集状态的变化。

Enzo — proteinA和宿主细胞残留以及蛋白聚集检测使用Enzo检测试剂和硫黄素T进行抗体聚 集物检测的有效线性动态范围。

产品货号产品名称规格
ENZ-51023-KP002PROTEOSTAT® Protein aggregation assay2*96 tests
ENZ-51023-KP050PROTEOSTAT® Protein aggregation assay50 tests


产品特点:

● 一种简单、灵敏、温度的荧光检测方法

● 可用于微孔板或流式细胞仪平台

● 可以帮助优化蛋白质制剂缓冲液和赋形剂

● 在较宽的pH值和离子强度范围内使用


蛋⽩热转移稳定性检测


Enzo提供的热转移稳定性检测试剂盒包括检测蛋白质聚集的荧光染料,因此它可用于监测系统热应力条件下的蛋白质稳定性。从热转移试验中,可以容易地确定大部分蛋白质聚集的温度。聚集温度是蛋白质稳定性的指标,可用于优化使蛋白质聚集最小化的条件,以及鉴定结合感兴趣蛋白质并赋予其结构稳定性的配体。

Enzo — proteinA和宿主细胞残留以及蛋白聚集检测使用Enzo检测试剂和硫黄素T进行抗体聚集物检测的有效线性动态范围。

产品名称产品货号规格
ENZ-51027-K400PRO ® TEOSTAT Thermal shift stability assay kit400 tests
ENZ-51027-K100PRO ® TEOSTAT Thermal shift stability assay kit100 tests


产品特点

● 是一种不需要样品分离或稀释的简单、灵敏、稳定的荧光分析方法

● 能够加速优化蛋白质稳定性条件

● 可以检测配体结合,即使事先不知道蛋白质的功能或配体结合位点

● 在较宽的温度、pH和离子强度范围内工作,并与常用缓冲剂和赋形剂兼容


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