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细胞增殖研究中使用alamar Blue的3个理由

发布时间:2023-01-10   点击次数:74次

如果您使用增殖细胞作为研究的一部分,您将知道监测其生长速度的重要性。培养中的细胞以异常速率分裂,可能表明其生长条件出现问题,并可能影响实验结果的有效性,更不用说留给您的实验细胞太少了。

细胞增殖研究中使用 alamar Blue 的 3 个理由


除了监测培养中的细胞生长外,许多实验还旨在比较以不同方式处理的细胞群的增殖或健康状况。例如,您可能想知道通过比较处理和未处理细胞的增殖来了解新候选药物对细胞分裂速率的影响。这些实验是如此常规,因此拥有一种每次都可以使用的简单、可靠的方法非常重要。访问科学文档、方案、故障排除建议和其他资源对于确保您从所选方法中获得最佳效果也至关重要。值得庆幸的是,有各种各样的工具和技术可用于跟踪细胞生长,蕞hao的细胞增殖体外检测器之一是 alamarBlue。我们将解释了什么是 alamarBlue 以及它是如何工作的,然后探讨了这种试剂的三个主要优点。我们还将向您介绍有用的资源,以支持您使用 alamarBlue 的学习。


什么是 alamarBlue?

alamarBlue 含有细胞渗透性,无毒的 REDOX 指示染料刃天青。响应细胞代谢,染料的颜色从弱荧光蓝色变为强荧光粉红色(图 1)。粉红色荧光的强度与活的呼吸细胞的数量成正比; 因此,AlamarBlue 是细胞健康的直接指标。


为何建议您使用 alamarBlue 进行细胞增殖检测呢?


优势一:alamarBlue 无毒

与其他增殖试剂相比,alamarBlue 不会干扰电子传递链或影响细胞呼吸或功能,因此无毒且使用安全(O'Brien 等人,2000)。这也意味着 alamarBlue 可能比有毒化合物更容易获得,用于教学实验室和项目学生的实验室。与有毒增殖剂不同,暴露于 alamarBlue 的细胞保持功能齐全,存活和健康,不受指示剂存在的影响。结合您不需要裂解细胞来测量 alamarBlue 活性的事实,您可以在测量增殖后保持细胞生长,并在以后的时间点进行重复测量。这使得 alamarBlue 适合长期的时间课程研究。


优势 2:alamarBlue 使用简单

alamarBlue 的工作流程很简单:将试剂添加到细胞中,孵育并测量(图 2)。作为一种高度信任和引用的化合物,许多实用的建议、方案和已发表的实验可以为您提供支持。alamarBlue 与多种培养基兼容,因此在添加 alamarBlue 之前,您不需要更换细胞培养基。哺乳动物细胞需要在标准培养条件下与 alamarBlue 一起孵育至少 1-4 小时:在 37°C 和 pH 6.8 至 7.4 之间。作为细胞增殖读数的颜色变化可以使用荧光或吸光度进行测量,以蕞适合您的实验室为准。在 570nm 和600nm 处监测吸光度,在 530-560nm 激发波长和 590nm 发射波长处监测荧光。然后,您可以使用简单的 alamarBlue 计算器来处理数字并指示细胞在时间范围内生长的速度。

细胞增殖研究中使用 alamar Blue 的 3 个理由

优势 3:alamarBlue 灵活

alamarBlue 的灵活性是它被广泛使用并作为增殖剂受到如此高度信任的另一个主要原因(它在PubMed 上有超过 3,000 次引用)。订购一种试剂并将其用于各种实验总是更容易,而不是在方案之间来回切换。


除了培养的哺乳动物细胞外,alamarBlue 还适用于其他细胞类型,包括细菌,酵母,真菌和原生动物,并且与贴壁或悬浮细胞兼容。alamarBlue 也可用于细胞计数低的实验,能够检测培养物中少至 50 个细胞!它适合与酚红一起使用,它只是稍微改变了测量值。alamarBlue 是广泛应用的不错选择,包括细胞增殖测定、相对细胞毒性生物测定和细胞因子测定。


alamarBlue 的灵活性延伸到实用优势。由于 alamarBlue 是水溶性的,因此不需要洗涤/固定或提取步骤。如果在进行实验的当天无法读取板,您可以将它们冷藏在塑料或铝箔包装中并在 1-3 天内读取它们,让您在方便时读取板,这可能有助于避免长时间在实验室!


探索 alamarBlue 的魅力


我们已经描述了我们喜欢 alamarBlue 的三个主要原因,以及它如何为您的细胞增殖实验增加价值。您可以在我们的专用资源页面上找到更多原因,说明为什么它可以成为您实验室的重要试剂,以及使用 alamarBlue 所需的所有工具。


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References

O’Brien J et al. (2003). Investigation of the Alamar Blue (resazurin) fluorescent dye for the

assessment of mammalian cell cytotoxicity. The FEBS Journal, 267, 5421-5426.

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