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TransIT-mRNA转染试剂协助活体颅内递送mRNA药物

更新时间:2023-02-03   点击次数:426次

由于mRNA独te的生物学优势受到越来越多的关注,并被用于基因治疗领域。湖北省十堰市太和医院神经外科团队在研究中筛选了一种安全、高效的转染试剂,即MIRUS的TransIT-mRNA转染试剂,该试剂成功实现将合成的mRNA在小鼠大脑进行颅内递送用于胶质瘤基因治疗。该论文发表于2022年3月的《Molecular Therapy》杂志。


团队实验的造模结果表明,使用商业化的转染试剂可以成功地将合成的mRNA递送至大脑,并且TransIT-mRNA显示出比in vivo jetPEI试剂盒更好的结果,该模型可用于胶质瘤的精确靶向和个性化基因治疗。该团队通过对比实验表明用in vivo jetPEI或TransIT-mRNA都可成功表达颅内注射的Luc-mRNA,但是TransIT-mRNA转染试剂的Luc-mRNA的生物荧光信号显著高于转染in vivo jetPEI的Luc-mRNA的信号。用TransIT-mRNA转染试剂注射Luc-mRNA时,荧光素酶的表达时间(60 h)远高于用in vivo jetPEI注射Luc-mRNA时(36 h)。


TransIT-mRNA转染试剂协助活体颅内递送mRNA药物抑制胶质母细胞瘤


图2. 采用普通转染试剂转染的合成mRNA在颅内的表达


(A)使用in vivo jetPEI介导的颅内表达颅内注射合成的Luc mRNA,通过使用N/P=6和N/P=8的IVIS进行检测,时间点为12h、24h、36h和48h。上面部分显示的是每个时间点具有代表性的图像,下面部分表示总结。

(B)使用1 μg和2 μg体系的TransIT- mRNA介导的颅内注射合成的Luc mRNA颅内表达,IVIS进行检测,时间点为12h、24h、36h、48h、60h和72h。上面部分是每个时间点具有代表性的图像,下面部分是总结。

(C)两种转染试剂的转染效率比较。用1 μg含TransIT- mRNA或in vivo jetPEI溶液的荧光素酶mRNA进行颅内注射。*p < 0.05;** p< 0.01。

(D)使用荧光显微镜进行检测TransIT- mRNA介导的颅内注射合成的RFP mRNA的颅内表达。


在实验中证实利用TransIT-mRNA转染试剂进行mRNA在体颅内给药是安全的。颅内递送TRAIL-mRNA的方法能够成功抑制胶质瘤的生长。而且通过对比实验结果,清楚地表明TransIT-mRNA在协助颅内Luc-mRNA递送方面优于jetPEI,可能是在in vivo jetPEI的成分含有阳离子聚合物PEI,PEI的强阳离子电荷导致细胞死亡,对比之下,TransIT-mRNA试剂更安全,无毒。所以颅内注射mRNA首xuan TransIT-mRNA转染试剂。后续的小鼠行为学和血液生物化学的指标也验证了相关试剂颅内应用于mRNA转染的生物安全性。另外,相关数据表明TransIT-mRNA转染试剂不影响被测试对象的代谢。体外合成的荧光素酶mRNA经颅内注射后,经常用的TransIT-mRNA转染试剂包裹后,在小鼠脑内高度表达。 TransIT-mRNA是shi界上di一个用于转染 mRNA的体外试剂,同时发现TransIT-mRNA在体内的应用效果也非常好。

 

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