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TransIT-X2转染试剂--低毒转染试剂产品介绍

更新时间:2023-05-17   点击次数:503次

TransIT-X2® DYNAMIC DELIVERY SYSTEM


高效  — — 完-美的广谱转染试剂

实用性广 — — 可以适合用于DNA质粒,siRNA/miRNA以及RNP复合物

科技 — — 非脂质体,阳离子聚合物递送

 

Mirus X2转染系统通过创新的聚合物体系有效地将DNARNA从核内体递送到细胞质中,克服了核酸递送的关键障碍。

如需购买Mirus转染试剂,请联系Mirus授权全国代理--欣博盛生物


TransIT-X2转染试剂

1.TransIT-X2® Dynamic Delivery System可在多种细胞类型中实现较高水平的基因表达

TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)和Lipofectamine®2000转染试剂(Thermo Fisher Scientific)试剂与DNA 3:1将编码荧光素酶的质粒DNA转染到41种不同的细胞类型中。使用标准荧光素酶测定法比较转染后24小时的荧光素素酶的表达。在优化比例下实验结果比较表明,使用TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)在41种细胞类型中的36种细胞中的荧光素酶表达优于或者等于竞争品牌;在17种细胞中TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemLipofectamine®2000表达水平的2倍,具体细胞在图中用表示。



TransIT-X2转染试剂

2. 使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System细胞中GFP表达水平较高

TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)将编码EGFP的质粒DNA转染到A549CHO-K1HepG2LNCaPMDCKPC-12、原代人乳腺上皮细胞(HMEC)和原代正常人真皮成纤维细胞(NHDF)。使用4-8μl TransIT-X2®MirusBio)递送2μg DNA。使用Zeiss Axiovert S100在转染后48小时拍照(32X)倒置荧光显微镜 *代表原代细胞。


TransIT-X2转染试剂

3.使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System在多个细胞系和原代细胞中的GFP转染效率较高

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)将编码EGFP的质粒DNA转染到A549CHO-K1Hep G2MDCKLNCaPPC-12、原代人乳腺上皮细胞(HMEC)和原代正常人真皮成纤维细胞(NHDF)中。使用0.2-0.4μl TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)在96孔板中进行转染,以递送0.1μg DNA(转染试剂:DNA的比率2:13:14:1)。转染48小时后,用guava® easyCyte™ 5HT流式细胞仪(MilliporeSigma)对三个孔进行分析。 *代表原代细胞。


TransIT-X2转染试剂

4. 使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System转染质粒DNAsiRNA

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)将Cy®5标记的编码核YFP质粒DNACy®3标记的siRNA转染到HeLa细胞。使用4μL TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)在6孔板中用聚-L-赖氨酸(PLL)涂层的盖玻片进行转染,以递送2μg DNA2:1试剂:DNA比)和25 nM siRNA。使用Alexa Fluor®350 PhalloidinThermo Fisher Scientific)对肌动蛋白细胞骨架进行染色。在转染后24小时使用Nikon A1R共焦显微镜拍摄图像(63X)。图像:黄色(核YFP)、蓝色(Cy®5标记的DNA)、红色(Cy™3标记的siRNA)、绿色(肌动蛋白细胞骨架)。


TransIT-X2转染试剂

5. TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemLipofectamine®2000具有更高的敲除率

TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)和Lipofectamine®2000转染试剂(Thermo Fisher Scientific)用于转染靶向内源性蛋白GAPDHaha1siRNA,或在原代正常人真皮成纤维细胞(NHDF)中递送非靶向对照。根据说明书,使用4μl TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)或6μl Lipofectamine®2000Thermo Fisher Scientific)和25nM siRNA6孔板中转染细胞。使用qRT-PCR测定GAPDHaha1mRNA相对于18S rRNA水平的量,然后在转染后48小时缩放到阴性对照的mRNA水平。误差条表示孔中的标准偏差。


TransIT-X2转染试剂

6.使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System有效递送miRNA 可降低PTK9 mRNA水平

TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)和Lipofectamine®2000转染试剂(Thermo Fisher Scientific)用于转染带有Pre-miR™ hsa-miR-1 miRNA前体(Thermo Fisher Scientific)或mirVana™ miRNA模拟物(Thermo Fisher Scientific)的T47D细胞miR-1两者都能降低PTK9 mRNA水平。转染Pre-miR阴性对照以评估基线mRNA水平。根据每个制造商的方案,使用3μl TransIT-X2®Mirus Bio)或Lipofectamine®2000Thermo Fisher Scientific)和50 nM miRNA12孔板中转染细胞。使用qRT-PCR测量PTK9 mRNA相对于18S rRNA水平的量,然后在转染后48小时将其换算为阴性对照的mRNA水平。误差条表示复孔的标准偏差。 


用于


TransIT-X2转染试剂

质粒DNAgRNA寡核苷酸转染

Cas9蛋白和gRNA都可以由质粒DNA编码用于转染。或者Cas9可以像质粒DNA一样被转染,gRNA可以作为RNA寡核苷酸。

这些方法的优点包括:

 低成本-质粒DNA是一种可再生、经济高效的格式

 灵活性-Cas9gRNA质粒适用于稳定或瞬时转染

 易于使用-gRNA寡核苷酸格式可将Cas9简单地重新定位到不同的位点


TransIT-X2转染试剂

7.Cas9质粒DNAgRNA寡核苷酸进行高效基因组编辑

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System24孔板的2µl/孔,Mirus Bio),用0.5µg编码pDNACas9Millipore Sigma)和50 nM PPIB靶向两部分gRNADharmacon/GE Healthcare)共转染HEK 293T/17U2OSNHDF细胞。T7E1错配检测法用于测定转染后48小时的切割效率。

 

Cas9/gRNA核糖核蛋白(RNP)转染

纯化的Cas9蛋白可与gRNA结合,形成RNP复合物,将其递送至细胞,用于快速高效的基因组编辑。

基于RNP的基因组编辑的好处

 高效转染-Cas9/gRNA复合物转染至多种细胞类型,包括难以转染的细胞,如免疫细胞和干细胞

 高特异性-预先形成的RNP复合物提供基因组编辑活动的快速脉冲

● DNA-无插入突变风险

TransIT-X2转染试剂

8. TransIT-X2®RNP转染方面优于其他试剂

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System1µl/孔,Mirus Bio)或Lipofectamine®CRISPRMAX™ 1.5µl/孔和1µl/Lipofectamine®Cas9 Plus™ 试剂,Thermo Fisher)或Lipofectamine®RNAiMAX1.5µl/孔,Thermo Fisher)或Lipofectamine™30001.5µl/孔和1µl/P3000™ 试剂,Thermo Fisher)将由靶向2部分gRNAIDT)的PPIB(亲环蛋白B)和Cas9蛋白(PNA Bio)组成的蛋白组成的核糖核蛋白(RNP)复合物递送到(AHEK 293T/17和(BU2OS细胞中。根据操作手册,采用24孔板,用6nM Cas9蛋白(PNA Bio)测试不同水平的gRNA6nM12nM)。T7E1错配检测法用于测定转染后48小时的切割效率。


TransIT-X2转染试剂

9.Cas9gRNA核糖核蛋白复合物在IPS细胞中进行基因组编辑

TransIT-X2® Dynamic Delivery System用于在人诱导多能干细胞(iPSC)中转染Cas9蛋白/gRNA核糖核蛋白(RNP)复合物。T7E1错配方法用于测定转染后48小时的切割效率。


供应商产品编号产品名称中文产品名称规格
MirusbioMIR 6000TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/适用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂质体高效低毒转染试剂1.5ml
MirusbioMIR 6003TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/适用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂质体高效低毒转染试剂0.3ml
MirusbioMIR 6004TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/适用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂质体高效低毒转染试剂0.75ml
MirusbioMIR 6005TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/适用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂质体高效低毒转染试剂5x1.5ml
MirusbioMIR 6006TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/适用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂质体高效低毒转染试剂10x1.5ml
MirusbioMIR 6010TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/适用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂质体高效低毒转染试剂0.1ml



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