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ELISA检测试剂盒的检测原理和五个操作要点

发布时间:2022-04-15   点击次数:94次
  ELISA检测试剂盒检测原理:采用免疫荧光定量检测技术、免疫层析法。用于检测人体全血、血浆样本中D-二聚体的含量。将血液样本和样品缓冲液在缓冲液瓶中进行混合,缓冲液中的荧光标记抗D-二聚体抗体和血液中的D-二聚体抗原结合形成抗原抗体复合物。
  ELISA检测试剂盒操作较繁杂,在操作中应留神以下5个方面:
  1. 跟着病况的进展或由其他因素影响,某些抗体在机体内的含量发作大幅动摇,因此有必要对标本进行预处理。间接法测定中,标本恰当稀释还可下降非特异性反响。
  2. 加样一般运用加液器,在ELISA检测试剂盒中一般有4次加样:加标本、加酶结合物、加底物和加间断液。加标本时有必要每份标本运用一支移液器吸嘴,避免交叉污染。加酶结合物、底物和间断液时则不需更换吸嘴。
  3.在成批手艺检测中,还应留神操作时差的影响。加样及混匀时间的差异,使抗原抗体反响和酶促反响时间不一致,对竞争法及定量检测影响很大,不留神可能会导致过错效果或定量不准。
  4. 洗刷是ELISA检测试剂盒操作过程中决议实验胜败的一个关键步骤。目的是除掉未结合的免疫反响物,间断抗原抗体反响,除掉标本中与反响无关的成分、游离的酶标物以及反响过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。
  5. 断定效果须运用ELISA检测试剂盒测读仪,比色法判读可选择单波长或双波长,根据反响液颜色的不同选用不同波长的滤光片,以空白孔校零测定反响孔的吸光度值。酶标仪具有杰出的重复性。
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