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小鼠ELISA试剂盒使用前的准备工作有哪些呢?

发布时间:2022-09-07   点击次数:17次
  小鼠ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA法,用抗磷脂酰丝氨酸(PS)抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的磷脂酰丝氨酸(PS)会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。
  依次加入生物素化的抗磷脂酰丝氨酸(PS)抗体和过氧化物酶标记的亲和素,抗体与结合在包被抗体上的磷脂酰丝氨酸(PS)结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),在过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,磷脂酰丝氨酸(PS)浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中磷脂酰丝氨酸(PS)的浓度。
  小鼠ELISA试剂盒检测前准备工作:
  1.请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
  2.将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结 晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶完全溶解后再配制洗涤液(加热温度不要超 过50℃,使用时洗涤液应为室温)。当日使用。
  使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37度溶解,每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为10000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,依次倍比稀释成不同的梯度,标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
  小鼠ELISA试剂盒使用注意事项:
  1.保存:小鼠ELISA试剂盒中各试剂请按说明书提示合理存放。在储存及温育过程中避免将试剂暴露在强 光中。所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染,否则可能会出现错误的结果。
  2.酶标板:刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成 任何影响。暂时不用的板条应拆卸后放入备用铝箔袋,按推荐温度存放。
  3.加样:加样或加试剂时,个孔与后一个孔的加样时间间隔如果太大,将会导致不同的“预温育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。每次的加样时间好控制在10分钟内。
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